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當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章

  • 2022

    5-23

    細(xì)胞黏附性是維持組織結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的基本條件,也是細(xì)胞運動和發(fā)揮功能的調(diào)節(jié)因素,并且對細(xì)胞的增殖、分化有重要影響。通??煞譃閮深?,即細(xì)胞與細(xì)胞黏附和細(xì)胞與基質(zhì)黏附。機體內(nèi)許多細(xì)胞,如上皮細(xì)胞,需要牢固地定在某處發(fā)揮功能;另一些細(xì)胞,如白細(xì)胞,活躍運動,就需要不斷調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附。細(xì)胞黏附性的改變在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中也發(fā)揮著重要作用。體外測定細(xì)胞粘附性實驗方法的建立,為粘附分子的發(fā)現(xiàn)、細(xì)胞間粘附影響的研究提供了極為有效的方法。公司擁有專業(yè)的實驗室、先進的實驗設(shè)備和經(jīng)驗豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)...

  • 2022

    5-23

    血管形成體外模型可分為細(xì)胞水平的增殖實驗、遷移實驗和管腔形成實驗,以及器官水平的人胎盤血管段培養(yǎng)模型和大鼠動脈環(huán)模型。目前通常所說的血管形成實驗是指管腔形成實驗。管腔形成反映毛細(xì)血管的早期過程,是體外檢查內(nèi)皮細(xì)胞功能最完整的指標(biāo)。血管形成過程中內(nèi)皮細(xì)胞會形成細(xì)胞條索,然后形成管腔,體外在特定條件下如基質(zhì)膠、膠原等培養(yǎng)時也能形成管腔。藥物通過抑制管腔形成或使形成的管腔斷裂來達(dá)到抑制血管形成的作用。借助計算機軟件計算小管數(shù)及小管之間的連接數(shù)及小管的長度和面積,可定量分析藥物對管腔...

  • 2022

    5-23

    熒光素酶報告基因系統(tǒng)是以熒光素(luciferin)為底物來檢測熒光素酶活性的一種報告系統(tǒng)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence)。然后可以通過熒光測定儀(化學(xué)發(fā)光儀)測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光。熒光素和熒光素酶這一生物發(fā)光體系,可以極其靈敏、高效地檢測基因的表達(dá)。雙熒光素酶體系,即有兩種熒光素酶,比較常見的組合是螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶,螢火...

  • 2022

    5-19

    【實驗方法與步驟】(1)細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo):HeLa細(xì)胞常規(guī)傳代培養(yǎng)至對數(shù)生長期(見細(xì)胞傳代培養(yǎng))。實驗組細(xì)胞加入順鉑溶液(生理鹽水配置)至終濃度為20μmo1/L,37℃,5%CO2條件下繼續(xù)培養(yǎng)。空白實驗對照加入等體積的生理鹽水,同樣條件繼續(xù)培養(yǎng)。24h后進行染色及形態(tài)學(xué)觀察。(2)胰酶消化細(xì)胞,將培養(yǎng)基上清及消化下來的細(xì)胞一同轉(zhuǎn)入離心管中600~800r/min離心10min。(3)吸去上清,用1mLPBS重懸細(xì)胞沉淀,并轉(zhuǎn)入1.5mL微量離心管中,600~800r/min...

  • 2022

    5-19

    微孔濾膜培養(yǎng)小室及雙室聯(lián)合培養(yǎng)系統(tǒng)(Transwell實驗):應(yīng)用微孔濾膜培養(yǎng)小室,進行膠質(zhì)瘤細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的聯(lián)合培養(yǎng),可以更接近體內(nèi)環(huán)境,模擬瘤細(xì)胞對血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用,濾膜上8μm的微孔可允許內(nèi)皮細(xì)胞穿過到達(dá)膜的下面,這些穿越遷移的內(nèi)皮細(xì)胞可粘附于膜的下面,通過計數(shù)濾膜下面的細(xì)胞可基本反映細(xì)胞的遷移情況。Transwell的基本原理是將Transwell小室放入培養(yǎng)板中,小室內(nèi)稱為上室,培養(yǎng)板內(nèi)稱為下室,上室內(nèi)添加上層培養(yǎng)液,下室內(nèi)添加下層培養(yǎng)液,上下層培養(yǎng)液以膜相隔。將...

  • 2022

    5-19

    一、實驗原理各種細(xì)胞操作,包括傳代、凍存和原代組織的分離,均能導(dǎo)致細(xì)胞死亡。為了確定群體細(xì)胞中的存活細(xì)胞數(shù),可采用臺盼藍(lán)染料排斥實驗(Phillips1973)。正常的健康細(xì)胞能排斥染料,但細(xì)胞膜完整性喪失后臺盼藍(lán)可彌散入細(xì)胞內(nèi)。染料排斥實驗是一種粗糙的估計細(xì)胞活力的方法,無法區(qū)別10%~20%的活力差異。除此之外,排斥染料的細(xì)胞有可能不貼壁或不能較長時問生存或繁殖。二、實驗方法1)胰蛋白酶處理細(xì)胞,無菌狀態(tài)下取0.5ml細(xì)胞用PBS稀釋至每毫升2X105~4X105。2)向...

  • 2022

    5-19

    一、細(xì)胞轉(zhuǎn)染細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA,RNA等導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染兩大類。本實驗室主要是質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、miRcroRNA轉(zhuǎn)染、慢病毒轉(zhuǎn)染、藥物轉(zhuǎn)染、多肽轉(zhuǎn)染等。二、miRcroRNA轉(zhuǎn)染(一)實驗材料及試劑六孔板、CO2培養(yǎng)箱、EP管、酒精燈等;無血清培養(yǎng)基、MEM-α或DMEM、RNA、lipofectamine2000、MSC細(xì)胞等。(二)實驗內(nèi)容1當(dāng)六孔板中MSC細(xì)胞密度達(dá)90%時,準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染,將無血清培養(yǎng)基、MEM-α或DMEM取出...

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