国产久久久久久久久久久,国产精品虐无码一区二区,蜜臀久久久久久久久免费,欧美 日韩 亚洲 av

咨詢熱線(微信同號(hào))

18017847121

當(dāng)前位置:首頁(yè)  >  技術(shù)文章  >  PCR反應(yīng)混合物的分子實(shí)驗(yàn)檢測(cè)步驟介紹

PCR反應(yīng)混合物的分子實(shí)驗(yàn)檢測(cè)步驟介紹

更新時(shí)間:2021-12-03      點(diǎn)擊次數(shù):2916

進(jìn)行分子實(shí)驗(yàn)檢測(cè)時(shí)需要先準(zhǔn)備PCR反應(yīng)混合物:根據(jù)DNA樣本的數(shù)量來(lái)確定除了DNA外其他混合物的體積(額外增加一份來(lái)確保有足夠的PCR反應(yīng)混合物),將擴(kuò)增每一個(gè)遺傳標(biāo)記并且在每一個(gè)PCR反應(yīng)管內(nèi)分19.5uL的反應(yīng)混合物。
  配制膠溶液:將25g尿素、7.5mL40%丙烯酰胺:PDA(19:1)加入到250mL的錐形瓶中。加蒸餾水至50mL,充分混勻來(lái)溶解尿素(見注釋4)。
  準(zhǔn)備制膠板:把膠板洗干凈,確保上面沒有灰塵,用硅化玻璃板。根據(jù)各個(gè)廠家的不同把玻璃板夾在一起并且用膠條封住底部(這一過(guò)程根據(jù)設(shè)備的不同而有所變化)。
  如果不用帶有加熱蓋的PCR儀,那么就需要在每個(gè)管子的頂部加入礦物油來(lái)防止液體蒸發(fā)。
  進(jìn)行分子實(shí)驗(yàn)檢測(cè)時(shí)在每個(gè)管子中加0.5的DNA樣本。
  把管子放在PCR儀中,95℃加熱3min變性DNA。
  95℃變性40s、55℃引物退火40s、72℃延伸40s,循環(huán)30-35次。
  把PCR產(chǎn)物和尿素上樣緩沖液1:1混合.
  加入500uL10%的過(guò)硫酸銨到膠混合液中并且通過(guò)濾紙過(guò)濾。
  取出10mL膠溶液加入到一個(gè)小燒杯中并且加10~15。馬上將膠倒到板上。幾分鐘之內(nèi)膠將聚合到一起,封玻璃板的底部。
  封好膠后,加15ul到剩余的膠溶液中并且馬上把膠倒到兩塊膠板之間。仔細(xì)插入膠梳子,讓膠聚合2h至過(guò)夜。
  取下膠底部的封條。把膠放在電泳槽中確保電極插入的方向正確。將膠槽中灌滿(大約1.5L,根據(jù)裝置的不同量有所不同)。拔掉膠梳子,沖洗上樣孔。
  把膠預(yù)熱60min直到溫度在50℃左右。
  在上樣之前再次用加樣器沖洗上樣孔。在每個(gè)孔中加產(chǎn)物和上樣染料(上樣量根據(jù)梳子的大小和PCR產(chǎn)物的濃度而不同)。根據(jù)產(chǎn)物片段大小的不同跑膠時(shí)間可以從30min到3h之間變化。

上海達(dá)為科生物科技有限公司
  • 聯(lián)系人:張
  • 地址:上海市長(zhǎng)江南路180號(hào)長(zhǎng)江軟件園B區(qū)B637室
  • 郵箱:2844970554@qq.com
  • 傳真:
關(guān)注我們

歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號(hào)了解更多信息

掃一掃
關(guān)注我們
版權(quán)所有©2025上海達(dá)為科生物科技有限公司All Rights Reserved    備案號(hào):滬ICP備15041491號(hào)-2    sitemap.xml    總流量:197083
管理登陸    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    
好吊妞免费视频在线观看| 熟妇丰满多毛的大隂户| 在线免费观看的av电影| 无码熟妇人妻AV在线影片免费| 久久精品aⅴ无码中文字字幕重口| 国产精品无码免费播放| 少妇做爰特黄a片免费看| 日本熟妇xxxxx乱| 国产精品久久久久久久日韩 | 日韩欧美精品suv| jαpαn丰满人妻hdxxxx| 一区二区三区欧美日韩精品| 握住校花两团雪乳高h| 三生三世十里桃花| 啊灬啊别停灬用力啊老师| 男人添女人荫蒂视频观看| 综合激情网一区二区三区| 国产亚洲精品久久久久| 十八成人网| 国产日韩精品中文字无码| 中出纯洁高中生在线观看| 亚洲熟女少妇一区二区| 影音先锋人妻每日资源站| 亚洲sss综合天堂久久| 久久久久亚洲AV成人片| 无码日本电影一区二区网站| 三级欧美精品中文字幕一区| 久热这里只有精品视频4| 亚洲第一 日韩av电影| 征服丰满人妻老师| 无码无在线观看| 欧美日韩成人天天综合影院| 深夜网站成人亚洲www| 日韩欧美熟妇久久久久久| 亚洲欧洲精无码AV毛片| 三年在线观看免费大全哔哩| 最新国产精品拍自在线播放 | 国产精品99亚发布| 精品javaparser乱偷| 久久99999| chinesehdxxxx|